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GB/T 38480-2020 | www.GB-GBT.com

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微生物源抗生素类次生代谢产物抗真菌活性测定 菌丝生长速率法

Determination of antifungal activity for microbial secondary metabolites - Mycelial growth rate method

1 范围

本标准规定了用菌丝生长速率法测定微生物源抗生素类次生代谢产物抗真菌活性的方法。

本标准适用于微生物源抗生素类次生代谢产物抗真菌活性测定。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

抑制中浓度

IC50

对真菌生长的抑制率达到50%时的浓度。

3.2

抗真菌活性

抗制真菌生长繁殖的能力。

4 原理

将供试次生代谢产物与培养基混合,以培养基上菌落的生长速度来衡量次生代谢产物抑丝状真菌

的能力,通过计算IC50来判定活性。

5 试剂或材料

除非另有规定,所用试剂均为分析纯。

5.1 水。GB/T 6682一级水。

5.2 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)。称取马铃薯浸粉3.0g、葡萄糖20.0g、琼脂20.0g,然后将上述各成分加入1000mL蒸馏水中,煮沸溶解,pH自然,分装至250mL锥形瓶中,121℃灭菌20min,备

用。也可采用市售的商业培养基。

5.3 指示菌标准菌株:立枯丝核菌

根据微生物源抗生素类次生代谢产物应用领域不同,也可以采用其他菌株作为供试菌。

6 仪器设备

6.1 恒温培养箱:温度偏差在±1℃以内。

6.2 超净工作台。

6.3 无菌培养皿:直径90mm。

6.4 测量仪:游标卡尺,精度0.1mm。

6.5 无菌打孔器:内径5mm±0.1mm。

6.6 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器。

7 操作步骤

7.1 指示菌培养

倾注融化并经121℃灭菌冷却至55℃左右的PDA固体培养基15mL于无菌培养皿内,待其凝固

后制成PDA平板,将立枯丝核菌冻存菌株用无菌接种针挑取少量菌丝接种到PDA平板中间,28℃±1℃恒温培养箱培养至菌丝覆盖整个平板,备用。上述操作均在超净工作台内进行。

7.2 供试样品制备

极性样品直接用水充分溶解(非极性样品加一定浓度的表面活性剂充分溶解),配制成一定浓度的

母液,经无菌0.45μm滤膜过滤,然后用无菌水(或相应的表面活性剂)按2倍或5倍浓度逐级稀释,制

备成至少5个不同浓度的待测溶液,逐级稀释时应确保既有抑制率大于50%分布的浓度点,也有抑制率小于50%分布的浓度点,现配现用。

7.3 检测平板制备

将7.2中制备的供试样品分别用冷却至55℃±1℃的PDA培养基按1∶9的比例稀释,充分混匀

后用无菌吸管各取10mL移至无菌培养皿内,轻轻摇动培养皿使其均匀铺平,待其凝固后制成检测平板,用对应的溶剂和PDA混合制备的平板作为空白对照平板,备用。

7.4 抑菌活性测定

用无菌打孔器(内径5mm±0.1mm)在活化的指示菌平板中相同的半径边缘打孔,用无菌镊子取

菌饼正置于7.3制备的检测平板中间。每个处理重复5次。将平板正置于28℃±1℃恒温培养箱中培养24h~48h,取出,采用十字交叉法测量菌落直径,两次测量所得的平均值即为菌落直径。

8 结果计算

抑制率按式(1)计算:

9 重复性

在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。

 

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GB/T 2975-2018 | www.GB-GBT.com

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GB/T 24533-2019

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GB/T 38046-2019

GB/T 38046-2019: Reflective vest for motor vehicle passengers ICS 03.220.20 T09 中华人民共和国国家标准 汽车乘员反光背心 2019-10-18发布 2020-05-01实施 国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 中国国家标准化管理委员会 发 布 目次 前言 Ⅲ 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 技术要求 2 5 试验方法 4 6 检验规则 6 7 放置要求 7 8 标志、包装、贮存及运输 7 附录A(规范性附录) 反光背心逆反射材料布置 8 参考文献 9 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国公安部提出并归口。 本标准起草单位:公安部交通管理科学研究所、道明光学股份有限公司。 本标准主要起草人:张军、潘汉中、马静洁、王宏、黄磊、孙飞、丁正林、董葵、郑嘉麒、许俊。 汽车乘员反光背心 1 范围 本标准规定了汽车乘员反光背心的技术要求、试验方法、检验规则、放置要求、标志、包装、贮存与运输。 本标准适用于汽车乘员反光背心的设计、制造和检验。 本标准不适用于其他职业专用的高可视性警示服。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 250 纺织品 色牢度试验 评定变色用灰色样卡 GB/T 251 纺织品 色牢度试验 评定沾色用灰色样卡 GB/T 2423.1 电工电子产品环境试验 第2部分:试验方法 试验A:低温 GB/T 2423.2 电工电子产品环境试验 第2部分:试验方法 试验B:高温 GB/T 3920 纺织品 色牢度试验 耐摩擦色牢度 GB/T 3922 纺织品 色牢度试验 耐汗渍色牢度 GB/T 3923.1 纺织品 织物拉伸性能 第1部分:断裂强力和断裂伸长率的测定(条样法) GB/T 3978 标准照明体和几何条件 GB/T 3979-2008 物体色的测量方法 GB/T 4669-2008 纺织品 机织物 单位长度质量和单位面积质量的测定 GB/T 7742.1 纺织品 织物胀破...
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